Malassezia pachydermatis CBS 1879 lipid droplets (LD) : an approach for the characterization of the structure and composition
Citas bibliográficas
Enlace de Referencia
Autores
Autor corporativo
Recolector de datos
Otros/Desconocido
Director audiovisual
Editor/Compilador
Fecha
Resumen
Malassezia pachydermatis se ha relacionado con la micobiota de la piel humana y animal, afecciones dermatológicas y enfermedades sistémicas. Estudiar el almacenamiento de lípidos en gotitas de lípidos o Lipid droplets (LD) permite abordar el papel oculto de estos organelos en Malassezia y tener una visión más amplia del metabolismo en esta levadura dependiente de lípidos. En este estudio, se estandarizaron dos protocolos para el análisis de LD, el primero destinado a caracterizar su morfología (tamaño y número) y la dinámica durante las diferentes fases de crecimiento mediante observación con una co-tinción con diferentes fluoroforos bajo microscopía de confocal de barrido láser. El segundo fue estandarizado para la extracción y purificación de la LD para análisis lipidómico. Malassezia pachydermatis tiene una o dos LD por célula, y el porcentaje de área ocupada varía entre 5 y 50%. La magnitud de LD aumenta durante las fases de crecimiento, con mayor tamaño durante la fase estacionaria. Mediante el análisis lipidómico, identificamos los lípidos neutros y fosfolípidos presentes en los LD, entre ellos encontramos triacilglicerol (TAG), diacilglicerol (DAG), ésteres de esterol (SE), ceramidas (Cer), colesterol (CHOL), ergosterol (ERG), un lípido no identificado (LX) y fosfatidilinositol (PI), fosfatidiletanolamina (PE), fosfatidilglicerol (PG), fosfatidilcolina (PC), fosfatidilserina (PS), lisofosfatidiletanolamina (lysoPE), lisofosfatidilserina (lysoPS), lisofosfatidilinositol (lysoPI), lisofosfatidilglicerol (lysoPG) y hexosilceramida (HexCer), respectivamente. Finalmente, en este estudio se determinó la composición morfológica y lipídica de LD, que se convierte en la base para un análisis más profundo. Los protocolos estandarizados aquí podrían usarse en otras especies de este género. Se requieren más análisis para revelar la función de LD en M. pachydermatis y otras especies de Malassezia
Resumen
Malassezia pachydermatis has been related to animal and human skin mycobiota, dermatological conditions, and systemic disease. Study lipid storage in lipid droplets (LD) allows to approach the hidden role of these organelles in Malassezia and to have a broader overview of the metabolism in this lipid-dependent yeast. Here, we standardized two protocols for the analysis of LD, the first aimed to characterize their morphology (size and number) and the dynamic during different phases of growth by observation with a co-staining under a laser scanning confocal fluorescence microscopy. The second was standardized for the extraction and purification of the LD for lipidomic analysis. Malassezia pachydermatis has one or two LD per cell, and the percentage of area occupied varies between 5 and 50%, the magnitude of LD increases during growth phases, with larger size during the stationary phase. Using the lipidomic analysis, we identified the neutral lipids and phospholipids of LD, among them we found triacylglycerol (TAG), diacylglycerol (DAG), sterol esters (SE), ceramides (Cer), cholesterol (CHOL), ergosterol (ERG), a lipid not identify (LX) and phosphatidylinositol (PI), phosphatidylethanolamine (PE), phosphatidylglycerol (PG), phosphatidylcholine (PC), phosphatidylserine (PS), lysophosphatidylethanolamine (lysoPE), lysophosphatidylglycerol (lysoPG), lysophosphatidylinositol (lysoPI), lysophosphatidylserine (lysoPS) hexosylceramide (HexCer) respectively. Finally, in this study the morphological and lipid composition of LD were determined, which becomes the basis for deeper analysis. The protocols standardized here could be used in other species of this genus. Further analyses are required to disclose the function of LD in M. pachydermatis and other Malassezia species